本制品是采用SYBR® Green I*嵌合荧光法进行Real Time PCR的专用试剂。制品中含有Real Time PCR反应的最适浓度SYBR® Green I,是一种2×浓度的Premix Type试剂,进行实验时,PCR反应液的配制十分方便简单。
本制品中还添加了Tli RNaseH(耐热性RNaseH),以cDNA作为模板进行PCR反应时,可以最大限度抑制由于cDNA中残存mRNA对PCR反应造成的阻害作用。
本制品Buffer经过改良,使反应特异性比SYBR® Premix Ex Taq(Tli RNaseH Plus)(Code No.RR420A)更高。能抑制非特异性反应,可以在宽广的范围内进行更加准确的定量。本Buffer和Hot Start法用DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq HS组合使用,可以进行重复性好、可信度高的Real Time PCR解析。
*:Takara Bio使用SYBR® Green I作为研究试剂已得到Molecular Probes Inc.的许可。SYBR®为Molecular Probes Inc.的注册商标。 |
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■ 保存 |
4℃。 |
注意: |
1. 4℃可保存6个月。 |
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2. 避光保存,避免污染。 |
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3. 干冰运输,到货后4℃避光保存。 |
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4. 长期保存请置于-80℃,勿存于-20℃。产品融解后请于4℃保存,并在6个月内用完。 |
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■ 试剂盒特长 |
1. 适用于Real Time PCR反应,可以快速、准确地对目的基因进行检测、定量。
2. 在2×浓度的Premix中,预先混有SYBR® Green I,PCR反应液配制时,只需加入模板、引物、灭菌蒸馏水便可进行Real Time PCR反应,操作简单方便。
3. DNA聚合酶使用了TaKaRa Ex Taq HS,可以进行Hot Start法PCR反应,再与Takara Bio公司独自开发的Buffer系统相结合,具有高扩增效率,高扩增灵敏度之特点。
4. 在2×浓度的Premix中,预先添加了耐热性RNaseH (Tli RNaseH),可以最大限度抑制以cDNA作为模板进行PCR反应时,由于cDNA中残存mRNA对PCR反应造成的阻害作用。 |
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■ 注意事项 |
1. 使用时请上下颠倒轻轻均匀混合,避免产生气泡,防止因混合不均匀造成的反应不足。
(1) 请勿涡旋振荡混匀。
(2) SYBR® Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (2× conc.)在-80℃存放可能会产生白色或淡黄色的沉淀,可用手握缓慢溶解,于室温短时间避光放置,轻柔上下颠倒混匀直至沉淀全部消失。
(3) 沉淀会导致溶液成分不均匀,使用前务必充分混匀试剂。
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2. 配制PCR反应液时, 试剂请于冰上放置。
3. 本制品中含有荧光染料SYBR® Green I,配制PCR反应液时应避免强光照射。
4. 反应液的配制、分装请一定使用新的 (无污染的) 枪头、Microtube等,尽量避免污染。 |