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  • 产品名称:Polyplus 101000046 jetPRIME® DNA/siRNA 转染试剂(114-15)
  • 产品货号:101000046/114-15
  • 产品规格:1.5ml
  • 产品品牌:jetPRIME
  • 供应商:Sartorius/赛多利斯
  • 产品产地: 美国 产品价格:¥2800
  • 产品说明书:
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  • 5°C±3°C保存
  • 详细信息:
  •  Polyplus 101000046 jetPRIME® DNA/siRNA 转染试剂(114-15)

     

     

    名称
    品牌
    货号
    规格
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    jetPRIME® DNA/siRNA 转染试剂
    jetPRIME® DNA/siRNA Transfection Reagent​
    Polyplus
    101000046
    1.5ml
    5°C±3°C

     

    一、产品概述
    jetPRIME®是一种高效、低毒性的阳离子聚合物转染试剂,适用于将DNA、siRNA或miRNA转染至多种哺乳动物细胞(包括难转染细胞)。其独特的配方确保高转染效率,同时保持优异的细胞存活率,广泛应用于基因表达调控、RNA干扰(RNAi)、CRISPR基因编辑等研究。
     
    二、核心特点​​
    1.高效率和低毒性​​
    ♦适用于难转染细胞(如原代细胞、干细胞、神经元等)。
    ♦细胞存活率高,转染后无需更换培养基。

    2.操作简便​​
    ♦无需优化试剂/DNA比例,按推荐比例即可获得高转染效率。
    ♦复合物形成时间短(约10分钟),直接加入细胞培养皿。

    3.广谱适用性​​
    ♦兼容多种细胞类型(HEK293、HeLa、CHO、NIH/3T3等)。
    ♦同时适用于DNA和siRNA共转染。

    4.无血清兼容​​
    ♦可在含或不含血清的培养基中使用。
     
    三、核心优势
    1.卓越的转染效率
    jetPRIME®是一种用于日常实验的强大转染试剂。它导致不同来源的转染粘附细胞系以及原代细胞的比例异常高。对于几种常用的细胞系,与顶级竞争对手的试剂相比,jetPRIME®试剂获得了70%至90%的优异转染效率
    (图1和图2)。
    图1 jetPRIME与其主要竞争对手的转染效率比较。在24孔板中转染后24小时,通过FACS分析在各种细胞系中评估转染效率。根据制造商对Lipofectamine®2000和jetPRIME®的建议使用条件。
     
    图2:jetPRIME®与Lipofectamine®3000的转染效率比较。在96孔板或24孔板中转染后24小时,通过FACS分析在各种细胞系中评估转染效率。根据制造商对lipofectamine®3000和jetPRIME®的建议使用条件。
     
    2.成本效益:更少的DNA和更少的试剂
    jetPRIME®是一种高效的体外转染试剂,需要少量试剂和质粒DNA,使用成本效益非常高(表1)
    Reagent
    Volume of reagent per well
    Amount of DNA per well
    Number of transfections per 1.5 mL vial
    jetPRIME®
    2 – 4 μL
    1 – 2 μg
    375 – 750
    Lipofectamine® 2000
    5 – 12.5 μL
    2.5 μg
    120 – 300
    Lipofectamine® 3000
    3.75 – 7.5 μL
    2.5 μg
    200 – 400

    表1 推荐使用条件。根据制造商的建议,用于转染的6孔板中每个孔的DNA和试剂(jetPRIME®和竞争对手)的量。

    除了降低成本外,使用更少的DNA还可以******限度地减少转染引发的不良细胞毒性作用。因此,jetPRIME®是高转染效率和优异细胞活力的上选试剂。

    3.更好的细胞活力

    jetPRIME®在转染过程中对细胞极为温和,可提高细胞活力并改善转染结果。用jetPRIME®转染的细胞是健康的,而用竞争对手观察到主要的细胞毒性(图3)。
    图3 转染后24小时细胞活力。根据制造商对每种试剂的建议进行转染后24小时HeLa细胞的相位对比显微镜检查。

    4.易于使用的protocol
    jetPRIME®是一种易于使用的转染试剂:快速方便地放大和缩小;与血清和抗生素兼容。
    图4 jetPRIME® protocol。DNA、siRNA以及DNA和siRNA共转染的方便方案。
     
    四、产品规格
     
    产品信息
    提供有
    jetPRIME®缓冲液
    应用
    应用
    质粒转染/基因组编辑/siRNA 转染/不同核酸的联合递送
    细胞类型
    贴壁细胞
    生物学信息
    传递分子类型
    DNA和siRNA共培养
    缓冲液体积
    2x60mL
    转染次数
    1.5mL jetPRIME®转染试剂足以在24孔板中进行1500次转染,或在6孔板中进行375次转染;1.5mL jetOPTI®转染试剂足以在24孔板中进行1500次转染,或在6孔板中进行375次转染。
    通用参数
    试剂与试剂盒类型
    jetPRIME®
    试剂含量
    jetPRIME® 1.5 mL
     
    五、产品的应用​​
    1.质粒转染
    jetPRIME®可导致不同来源的转染粘附细胞系以及原代细胞的百分比显著较高(表1)。
    表1 使用jetPRIME®的各种细胞类型的转染效率。转染后24小时通过FACS分析测定GFP阳性细胞的百分比。
     
    质粒是常见于细菌中的环状DNA小分子。质粒与染色体DNA分开存在和复制,在细菌中,质粒通常携带有利于细菌生存的基因。质粒可以被有意地引入所需的细胞中,并用于在特定细胞系中过表达感兴趣的基因。这种过程被称为DNA转染,是研究感兴趣的基因功能或蛋白质的常用方法。

    2.基因组编辑
    CRISPR/Cas9系统在哺乳动物细胞中的使用最近已经成为在特定基因座修饰细胞基因组的一种非常方便的方法。它涉及将(a)编码Cas9的一个或多个质粒、特异性gRNA和最终要插入的序列,或(b)一个或两个质粒和RNA分子(gRNA)的混合物瞬时转染到哺乳动物细胞中。

    3.siRNA转染
    jetPRIME®可使多种细胞系的内源性基因表达降低90%以上。例如,jetPRIME®介导的用靶向HeLa细胞中内源性层粘连蛋白A/C的10nM siRNA双链体转染HeLa细胞,将层粘连蛋白/C基因表达显著降低到几乎无法检测的水平(图1)。
    图1使用jetPRIME®的内源性层粘连蛋白A/C沉默。用10nM的21-mer层粘连蛋白A/C siRNA转染HeLa细胞。48小时后,使用抗层粘连蛋白A/C的抗体通过免疫荧光显微镜评估层粘连蛋白/C沉默。

    4.不同核酸的共转染
    jetPRIME®非常适合DNA和siRNA/miRNA共转染实验或几种DNA质粒的共递送。
    Polyplus用jetPRIME®进行了DNA和siRNA递送,并在各种毒性极低的细胞系中观察到高效的基因沉默。使用10nM的siRNA,在贴壁细胞中实现了超过90%的沉默(图2)。
    图2 使用jetPRIME®进行DNA和siRNA共转染后,几种细胞系中的外源性萤光素酶沉默。在6孔板中用每孔400ng p4CMV Luc和10nM荧光素酶siRNA进行实验。
     
    六、实验流程(简要版)​​
    1.制备转染复合物:
    ♦在无菌管中混合DNA/siRNA + jetPRIME®(比例参考说明书)。
    ♦涡旋10秒,室温静置10分钟。
     
    2.转染细胞:
    ♦将复合物滴加至细胞培养基中,轻柔混匀。
    ♦37°C培养24-72小时后检测表达或沉默效果。
     
    七、注意事项
    1.关键优化点:
    ♦首次使用时,建议测试不同DNA:试剂比例(如0.5:1至1:3)。
    ♦转染时避免使用抗生素(如Pen/Strep),以防细胞毒性。
     
    2.适用细胞验证:
    ♦对极难转染细胞(如原代T细胞),可尝试jetPRIME® Endo-Free版本(货号:101000010)。
     
    3.细胞状态:
    ♦建议细胞密度达50-70%时转染。
     
    4.优化建议:
    ♦首次使用可测试不同比例(参考说明书)。
     
    八、储存条件
    5°C±3°C保存,避免冷冻或高温(保质期见包装标签)。
     
     
     
     

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