13926 ZENOAQ STEM-CELLBANKER® DMSO-free GMP级 100mL

产品名称:13926 ZENOAQ STEM-CELLBANKER® DMSO-free GMP级 100mL
产品货号:13926
产品规格:100mL
产品品牌:ZENOAQ
供应商:ZENOAQ
产品产地: 日本产品价格:￥3850
产品说明书:有

　　　　　北京　北京

保存于运输说明：
2至8°C或－20℃以下

详细信息：

名称	品牌	货号	规格	保存
无DMSO干细胞冻存液 GMP 级 STEM-CELLBANKER® DMSO-free GMP grade	ZENOAQ	13926	100mL	2至8°C或－20℃以下
无DMSO干细胞冻存液 GMP 级 STEM-CELLBANKER® DMSO-free GMP grade	ZENOAQ	13925	20mL	2至8°C或－20℃以下

一、产品概述

STEM-CELLBANKER® DMSO Free GMP级是一种化学成分明确的冷冻溶液，不含DMSO作为抗冻剂。它是为那些由于预期用途多种而不喜欢使用含DMSO的冷冻保存溶液的客户开发的。它完全不含血清和动物源性成分，仅含有USP、EP、JP 分级成分或 JP 赋形剂。

STEM-CELLBANKER® GMP等级在符合日本、欧盟、美国和PIC/S GMP指南的设施中生产，生产和质量均按照日本GMP指南进行控制。

二、产品优势

•不含血清和动物源性成分。

•即用型，方案简单。

•通过完整的配方、无需进一步制备、在 -80°C下直接冷冻或可编程冷冻等，节省成本/时间/步骤。

•采用优质成分安全冷冻保存，无污染动物源性成分的风险，批次间稳定性。

•符合GMP的严格监控高质量产品。

※本产品已于2016年在PMDA的MF注册，并于2019年在CBER（生物评估与研究中心）/FDA（美国食品和药物管理局）的BBMF中注册。

三、产品应用

当用本产品在以下细胞中进行测试时，观察到细胞活力的 80-90%。

Cell type	Description
P3/x63-Ag8.U1	Murine myeloma cell
2D-8	Murine hybridoma
YAC-1	Murine lymphoblast
NBM-Lu	Normal newborn murine fibroblast cell line
129SV	Mouse ES cell
Feline PBMC	Feline peripheral blood mononuclear cells
Canine PBMC	Canine peripheral blood mononuclear cells
Jurkat	Human T-cell line
SK007	Human B-cell line
K562	Human caucasian chronic myelogenous leukaemia cell
HeLa	HUman uterine cervical carcinoma cell
HepG2	Human hepatocellular carcinoma cell
Caco-2	Human colonic adenocarcinoma cell
UE6E7-16	Human Mesenchymal cell
UE7T-13	Human Mesenchymal Stem cell
201B7	Human iPS cell

四、质量控制标准

项目	标准值
外观	无色至淡黄色透明液体
pH值	7.2–7.6（25℃）
渗透压	280–340 mOsm/kg
无菌性	符合药典无菌检查要求
内毒素	≤0.25 EU/mL
细胞活力（MSC）	复苏后存活率≥90%（对比DMSO对照组）

五、储存与稳定性

在2至8°C或-20°C以下储存，未开封在2至8°C储存时，产品自制造之日起可保持稳定3年。

六、方案

冻结

为了获得******结果，用于冷冻保存的细胞应处于生长的对数阶段。可以替代类似或标准的冷冻方案。

1.检查并确保细胞培养物没有污染，处于健康状态和适当的汇合度等。

2.进行细胞计数以确定细胞的活力。

3.轻轻沉淀细胞离心（在1,000~2,000rpm，4°C下3-5分钟）。使用吸气器去除上清液。

4.用STEM-CELLBANKER（1ml 用于 5x10®5- 5x106细胞）。

5.将1 ml等分试样的细胞悬液分配到已标有细胞系名称、细胞浓度、传代日期和其他基本信息的冷冻保存瓶中。

6.将小瓶直接置于 -80°C 或可编程冰箱中进行储存。如有必要，在小瓶冷冻至少24小时后，将冷冻小瓶转移到液氮储罐中。

解冻

1.将冷冻细胞从储存中取出，并在37°C摇动水浴中快速解冻。

2.立即稀释并轻轻地将每1毫升细胞与10毫升完全细胞培养基混合。使用CELLOTION®更有效。

3.轻轻沉淀细胞离心（在1,000~2,000rpm，4°C下3-5分钟）。取出上清液吸引器。

4.用适当体积的完全细胞培养基轻轻悬浮细胞。然后放入培养瓶中。

5.根据标准方案继续进一步的培养程序。

七、详细使用方法

（1）使用前准备

1.冻存液复苏

•将STEM-CELLBANKER® Dfont-size:10.5000pt;">

•融化后，轻轻颠倒混匀3-5次，确保溶液均匀。检查冻存液外观，应为无色至淡黄色透明液体，无沉淀或浑浊，若异常禁止使用。

2.细胞准备

•待冻存细胞需处于对数生长期，活率≥90%。贴壁细胞需用胰蛋白酶等消化液消化成单细胞悬液，悬浮细胞直接离心（1000-1200 rpm，5分钟）收集。

•用预冷的无血清培养基（如PBS或专用基础培养基）洗涤细胞2次，每次离心后弃上清，轻轻重悬细胞，避免机械损伤。

3.试剂与耗材准备

•提前预冷15 mL离心管、冻存管（建议使用无菌、无酶的CryoTube™）、移液枪及吸头。

•准备4℃离心机、生物安全柜、-80℃冰箱及液氮罐。

（2）细胞冻存操作步骤

1.细胞计数与重悬

•取少量细胞悬液进行活率计数，根据目标冻存密度（通常1×10⁶-1×10⁷ cells/mL）计算所需冻存液体积。

•按“细胞沉淀：冻存液 = 1:1”的比例，向细胞沉淀中缓慢加入预冷的STEM-CELLBANKER® Dfont-size:10.5000pt;">

2.分装与标记

•将细胞悬液迅速分装至预冷的冻存管中，每管体积1-2 mL（建议不超过冻存管容积的2/3），立即拧紧管盖。

•标记冻存管信息，包括细胞名称、代数、冻存日期、浓度及操作者。

3.梯度降温冻存

•方法一（程序降温盒）：将冻存管放入含异丙醇的程序降温盒中，置于-80℃冰箱，降温速率约-1℃/分钟，过夜（至少8小时）后转移至液氮罐（气相区，-196℃）长期保存。

•方法二（自动化程序降温仪）：设置降温程序为4℃（5分钟）→ -1℃/分钟至-40℃ → -10℃/分钟至-80℃，完成后转移至液氮罐。

•禁止直接放入-80℃或液氮，避免细胞因快速降温受损。

（3）细胞复苏操作步骤

1.冻存管取出与融化

•从液氮罐中取出冻存管，立即放入37℃水浴锅中快速晃动（1-2分钟），直至冻存液完全融化（仅剩一个小冰晶时取出，避免过度加热）。

•用75%酒精擦拭冻存管外壁，移入生物安全柜。

2.细胞洗涤与培养

•打开冻存管，将细胞悬液缓慢加入至10 mL预温的完全培养基中（比例≥1:5），轻轻混匀，离心（1000 rpm，5分钟）弃上清。

•用完全培养基重悬细胞沉淀，调整密度后接种至培养瓶/皿，置于37℃、5% CO₂培养箱中培养，24小时后更换培养基，去除残留冻存液成分。

（4）注意事项

1.冻存液使用

•冻存液融化后应在2-8℃保存，24小时内使用完毕，禁止反复冻融。

•若需分装，应在无菌条件下操作，分装后-80℃保存，避免污染。

2.细胞状态

•确保冻存前细胞活率≥90%，污染（细菌、真菌、支原体）检测为阴性。

•复苏后24小时内避免频繁观察或移动培养物，待细胞贴壁/稳定生长后进行后续操作。

3.安全规范

•操作全程在生物安全柜内进行，佩戴手套、护目镜，避免冻存管爆裂导致的生物危害。

•液氮操作时使用专用防护手套和面罩，防止冻伤。

4.质量控制

•建议每批次冻存后随机抽取1-2管进行复苏验证，检测细胞活率（目标≥80%）、增殖能力及功能活性（如干细胞的分化潜能）。