Gibco ExpiCHO™表达培养基（货号：A2910001）

产品名称:Gibco ExpiCHO™表达培养基（货号：A2910001）
产品货号:A2910001
产品规格:1000mL/瓶
产品品牌:Gibco
供应商:Gibco
产品产地: 美国产品价格:￥3918
产品说明书:有

　　　　　北京　北京

保存于运输说明：
2~8℃避光保存，禁止冷冻

详细信息：

一、产品基本信息

项目	详情
产品全称	ExpiCHO™表达培养基 ExpiCHO™ Expression Medium
品牌	Gibco
货号	A2910001
规格	1000mL / 瓶
储存条件	2~8℃避光保存，禁止冷冻

二、产品核心概述

ExpiCHO™ 表达培养基是按照 GMP 标准生产且化学成分确定的无血清、无蛋白且无动物来源的培养基，专为悬浮适应的中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞的高密度生长及转染而设计。它是 ExpiCHO™ 表达系统试剂盒（货号 A29133）的核心组分，用于可扩展的瞬时转染蛋白生产。

ExpiCHO 表达培养基：

• 支持悬浮 CHO 培养物的生长直至密度超过 2 x 107 个细胞/mL，同时保持细胞活力 > 95%

• 使用兼容转染的无血清悬浮培养基，配合 ExpiFectamine™ CHO 转染试剂可实现 > 90% 的高转染效率

• 支持在 6 x 106 个细胞/mL 的密度下瞬时转染悬浮 CHO 细胞

• 促进高密度瞬时转染培养物的持续高水平表达，从而实现高达 3 g/L 的重组蛋白得率

• 支持 CHO 细胞在各种培养方式下的生长和转染，从多孔板中的 <1 mL 到台式生物反应器中的 >10 L

• 不含酚红

ExpiCHO 表达培养基配方中包含 GlutaMAX™-I 试剂。可直接使用，无需添加剂。化学成分明确的配方可实现高度的重现性和批间可靠性。为了获得较高水平的瞬时蛋白表达，该培养基应与匹配的培养基补料——ExpiCHO™ 补料配合使用，后者作为 ExpiFectamine™ CHO 转染试剂盒（货号 A29129）。不推荐将 ExpiCHO 表达培养基用于贴壁细胞培养。细胞通常置于锥形瓶内，放在摇床平台上，然后放入加湿的 CO2 细胞培养箱内生长。但是培养体积可以从多孔板中的 <1 mL 扩展到生物反应器中的 >10 L。

ExpiCHO表达培养基可支持CHO细胞高密度生长

ExpiCHO表达培养基可使未转染的ExpiCHO-S细胞培养密度达到2000万细胞/毫升以上（红色实线），同时细胞活率可维持在95%以上（蓝色虚线）。

三、核心产品优势

1. 高表达高效率：配方专属优化，适配ExpiCHO‑S细胞快速增殖，细胞倍增时间约17小时，最大培养密度可达2×10⁷ cells/mL，可实现重组蛋白、抗体的超高产量表达，远超传统CHO培养基表达效率。

2. 极简实验流程：支持细胞直接复苏入该培养基，培养、扩增、转染全程无需更换培养基，省去换液驯化步骤，大幅简化实验操作、降低污染概率。

3. 高安全性高稳定性：无血清、无动物源、无酚红配方，消除异种蛋白干扰与病毒污染风险，适配合规性研发与产业化申报；批次差异极小，实验数据可重复性强。

4. 悬浮培养专属适配：仅适用于悬浮细胞培养，不支持贴壁细胞培养，完美匹配生物反应器、摇瓶等规模化悬浮培养体系，可无缝实现从实验室小试到工业中试的工艺放大。

5. 体系兼容性强：可搭配ExpiFectamine™ CHO转染试剂、EfficientFeed™系列补料试剂使用，适配完整的ExpiCHO瞬时表达工艺体系。

四、适用范围

1. 主要用于ExpiCHO‑S细胞的复苏、传代扩增、高密度悬浮培养；

2. 应用于CHO细胞瞬时转染实验，高效表达重组抗体、功能性重组蛋白；

3. 适配科研级蛋白研发、工艺优化、小批量样品制备及中试规模化生产；

4. 仅适用于悬浮驯化CHO细胞体系，禁止用于贴壁细胞培养。

五、产品规格

参数项	参数详情
适配细胞系	CHO-S、悬浮驯化 CHO 细胞
细胞类型	中国仓鼠卵巢细胞（CHO cells）
浓度规格	1× 工作液，无需稀释
匹配表达系统	ExpiCHO-S™
产品线	ExpiCHO 系列
产品类别	CHO 细胞表达培养基
成分分类	无动物源、化学成分明确、无蛋白、无血清
培养模式	悬浮细胞培养
产品形态	无菌液体
血清含量	无血清
无菌处理	无菌过滤灭菌，出厂无菌
内置添加剂	GlutaMAX 稳定谷氨酰胺
不含成分	酚红
销售单位	每瓶（Each）

六、标准使用操作说明

（一）使用前准备

1. 培养基回温：实验前将培养基置于室温（20–25℃）自然回温，禁止37℃水浴长时间加热，避免营养成分失活；轻轻摇匀培养基，确保成分均匀，无需高压灭菌（产品出厂无菌）。

2. 环境准备：全程在无菌超净台操作，确保器皿、摇瓶、设备无菌无污染。

3. 试剂搭配：常规体系无需额外添加L‑谷氨酰胺，培养基已含稳定配比谷氨酰胺；特殊高密度培养可按需配套专用补料试剂。

（二）细胞复苏培养

1. 超净台内取新鲜回温的ExpiCHO™表达培养基，加入无菌摇瓶中；

2. 将冻存的ExpiCHO‑S细胞快速解冻，直接接种至培养基中，无需培养基驯化；

3. 培养条件：37℃、8% CO₂、恒温摇床悬浮培养，转速依据培养容器调整（摇瓶常规125–135rpm）；

4. 培养24小时后观察细胞活率与密度，正常细胞可快速复苏、均匀生长。

（三）细胞传代扩增

1. 待细胞密度生长至1.2–1.5×10⁷ cells/mL、活率≥95%时进行传代；

2. 用新鲜ExpiCHO™表达培养基稀释细胞，调整初始接种密度为3–4×10⁶ cells/mL；

3. 维持标准培养条件，持续扩增，为转染实验准备对数生长期高活性细胞。

（四）瞬时转染实验操作

1. 转染当天调整细胞密度至合适浓度，保证细胞处于对数生长旺盛期；

2. 直接在本培养基体系中进行转染操作，无需更换新鲜培养基、无需稀释预处理；

3. 搭配ExpiFectamine™ CHO转染试剂按照标准流程完成质粒‑转染试剂复合物制备与加样；

4. 转染后按实验方案适时添加增强补料试剂，持续培养7–14天，收集细胞上清获取重组蛋白。

（五）实验收尾与耗材处理

1. 剩余培养基及时封口，放回2–8℃冷藏避光保存；

2. 废弃细胞液、污染培养基按生物安全规范无害化处理；

3. 清洁超净台与培养设备，做好实验记录。

七、关键注意事项

1. 适配性禁忌：本品为悬浮细胞专用培养基，绝对不可用于贴壁CHO细胞培养，会导致细胞生长异常、死亡；

2. 温度禁忌：严禁冷冻、高温加热，回温仅可室温自然解冻，避免有效营养成分、缓冲体系失效；

3. 无菌管控：开封后严格无菌操作，避免微生物污染，过期、浑浊、沉淀的培养基禁止使用；

4. 工艺规范：不可与其他品牌普通CHO培养基随意混用，会破坏体系平衡，降低蛋白表达效率；

5. 成分特性：无酚红体系，培养基无显色指示剂，无法通过颜色判断污染，需定期镜检观察细胞状态与培养基澄清度；

6. 配套要求：规模化高产表达建议搭配原厂配套转染试剂、补料试剂，保障表达效率与实验稳定性。

八、常见问题解答 (FAQ)

（1）可以用其他培养基代替 ExpiCHO 培养基来培养ExpiCHO-S细胞吗？

不可以。ExpiCHO 表达系统能够达到极高的产物滴度，这是因为该系统的组分经过优化，互相配合，达到最佳的蛋白表达效果。ExpiCHO 培养基是一种兼容转染的高密度生长培养基，专门用来与 Gibco ExpiCHO 养料和 ExpiFectamine CHO 增强剂搭配使用。其他培养基无法与 ExpiCHO 系统匹配，可能最终会抑制蛋白表达。

（2）ExpiCHO表达培养基（货号A2910002）不慎冷冻过，还能继续使用吗？

本品标准储存条件为2~8℃，严禁冷冻。培养基不慎冷冻后最大问题是内部营养成分溶解度改变。若已经冷冻，建议放置在2~8℃环境中过夜缓慢解冻。完全解冻后如果未出现沉淀，理论上可使用，但厂家无法保证其培养、蛋白表达效果。

（3）转染前一天传代ExpiCHO细胞，调整细胞密度至3~4×10⁶个/mL，请问推荐将细胞离心沉淀后重悬于全新培养基，还是仅补充部分培养基稀释至目标密度即可？

转染前传代ExpiCHO细胞时，无需完全更换培养基。全部换新培养基成本高，且体系并不需要去除旧培养上清。

（4）ExpiCHO细胞建议传代多少次后，就更换冻存低代次的新细胞？

若要获得最佳蛋白表达效果，建议复苏ExpiCHO细胞后传代培养2～3次，再开展转染实验。整体不建议细胞传代次数超过20代。

（5）使用ExpiCHO表达系统，转染后需要培养多少天再收集蛋白？

蛋白最佳收集时间取决于目标蛋白自身特性以及选用的实验方案。不同方案下，收获最高蛋白表达滴度的常规收集时间如下：

1.Standard Protocol（标准方案）：转染后8～10天收集

2.High Titer Protocol（高滴度方案）：转染后10～12天收集

3.Max Titer Protocol（最高滴度方案）：转染后12～14天收集

九、储存条件与有效期

1. 储存条件：2~8°C避光保存，严禁冷冻，冷冻会导致培养基有效成分析出、失效；

2. 开封后储存：无菌操作开封后，持续2–8℃避光保存，建议4周内用完，避免成分降解、污染；

3. 有效期：自生产之日起12个月；

4. 运输条件：环境温度。