一、产品基础信息
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产品名称
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品牌
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货号
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规格
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保存
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CTS™ 免疫细胞血清替代物
CTS™ Immune Cell Serum Replacement
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Gibco
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A2596101
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50mL
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-5～-20°C
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二、产品概述及核心应用
2.1 产品简介
CTS™ 免疫细胞血清替代物 (SR) 设计用于添加入基础细胞培养基（如 CTS™ OpTmizer™ T 细胞扩增 SFM 或 CTS™ AIM-V™ SFM）以支持人免疫细胞（如 T 细胞）的体外培养扩增。CTS™ 免疫细胞 SR 是一种成分明确且无异种成分的配方，并且不含牛或其他非人动物源性组分。
•尽可能降低了与人血清相关的供应和安全风险
• 支持多克隆 T 细胞（CD3/CD28 微珠活化、OKT3 mAb 活化以及病毒特异性和肿瘤特异性 T 细胞）的扩增
• 对 T 细胞表型（CD4、CD8 和 CD62L）的支持作用可媲美人血清
• 支持基因修饰 CAR T 细胞（慢病毒转导）的扩增
• 减少了与验证人血清相关的成本和时间
• 足够通用，可配合您选择的基础培养基使用
2.2 主要应用场景
1. 原代人T细胞、CD4/CD8 T细胞体外活化与规模化扩增；
2. CAR-T、TCR-T等基因工程修饰T细胞慢病毒转导、传代培养；
3. NK细胞、NKT细胞、树突状细胞（DC）、巨噬细胞体外诱导培养；
4. 支持密闭式生物反应器、一次性生物工艺袋产业化放大生产；
5. 临床级别细胞样品制备，满足FDA、NMPA IND申报原料资质要求。
2.3 适配基础培养基
CTS OpTmizer T细胞扩增培养基、CTS AIM-V无血清基础培养基。
2.4 实验数据
1.扩增后T细胞的CAR基因转导效率
本实验采用羊抗小鼠IgG（重链+轻链）二抗染色法检测CAR转导效率；未进行CAR病毒转染的扩增T细胞作为染色阴性对照组（图中未展示）。
2.在CAR基因改造T细胞扩增培养中，添加免疫细胞血清替代物（ICSR）的培养效果与人源血清相当。
原始人源T细胞由宾夕法尼亚大学人类免疫学核心实验室提供。采用Dynabeads CD3/CD28磁珠以磁珠:细胞=3:1的比例，分别在两种培养基体系中活化T细胞：商品化造血基础培养基+5%人AB血清、商品化造血基础培养基+5%免疫细胞血清替代物（ICSR）；随后使用靶向CD19的CAR慢病毒载体对T细胞进行基因转导。
全程采用T-225细胞培养瓶进行细胞扩增培养；使用库尔特颗粒计数仪（Coulter Multisizer 3）统计细胞数量，持续扩增直至细胞体积接近静息细胞大小。图中T细胞扩增曲线为随培养时间变化的T细胞累计总数。
3.采用免疫细胞血清替代物（ICSR）培养的CAR基因修饰T细胞体内抗肿瘤药效评价
本研究采用免疫缺陷小鼠白血病模型，验证在添加免疫细胞血清替代物（ICSR）的培养基中培养的CD19靶向CAR-T细胞的体内抗肿瘤药效。实验选用NOG（NOD/Shi-scid/IL-2Rγ敲除）免疫缺陷小鼠，每只小鼠尾静脉注射100万株携带荧光素酶基因的NALM-6白血病细胞构建荷瘤模型；待小鼠稳定成瘤后，通过活体成像检测肿瘤负荷，并随机分组给药，每组小鼠回输100万株对应培养体系制备的T细胞，未进行CAR基因转染的T细胞作为阴性对照组。
第-1天为T细胞回输前的初始肿瘤负荷；CAR-T细胞回输2周后即可有效抑制体内白血病细胞增殖，而仅输注普通未修饰T细胞的对照组小鼠最终均死于白血病。
关键结论：ICSR培养制备的CAR-T细胞可使6/6只荷瘤小鼠实现白血病肿瘤清除；而人AB血清培养的CAR-T细胞在实验第49天无法有效控制肿瘤进展。
三、产品核心优势
1. Xeno-free无异种成分：无动物源原料，消除异种蛋白致敏、外源病毒污染隐患，优于胎牛血清、人混合血清；
2. 批次稳定性高：工业化化学合成工艺，批次差异远低于人AB血清，实验重复性更强；
3. 维持T细胞功能表型：稳定保障CD4、CD8、CD62L、CD45RO等记忆T细胞标志物表达，提升细胞体内抗肿瘤持久性；
4. GMP全流程可追溯：CTS临床级资质，全供应链溯源，附带COA、SDS、溯源文件，适合细胞药物注册申报；
5. 工艺兼容性强：可用于无菌管路焊接、密闭式全封闭培养系统，适配工业化放大生产；
6. 简化供应链管理：无需采购、质检、灭活人源血清，大幅降低原料验证工作量与合规成本。
四、储存、运输与有效期
1. 长期储存条件：-20℃ ~ -5℃避光冷冻保存，禁止反复冻融；
2. 分装后储存：解冻后无菌分装为5~10 mL/支，-20℃避光冷冻，建议分装后6个月内用完；冻融次数不得超过2次；
3. 配制完全培养基后稳定性：添加本品的完全培养基，2~8℃避光密封保存，有效期最长4周；
4. 运输方式：干冰冷链全程运输，到货后立即转入-20℃冰箱，禁止常温放置。
五、试剂解冻与无菌分装操作规程
1. 取出冻存试剂，装入密封保鲜袋，室温（15~30℃）避光自然解冻，严禁37℃水浴快速加热，防止活性蛋白变性失活；
2. 完全融化后，轻柔颠倒混匀3~5次，禁止剧烈震荡、高速涡旋，避免产生大量泡沫；
3. 在BSL-2级生物安全柜内无菌操作，使用无菌离心管分装；
4. 分装完毕后，剩余原液快速放回-20℃冷冻；分装小管做好标识：货号、分装日期、有效期。
六、完全培养基配制规范
6.1 推荐工作添加浓度
1.常规人T细胞、CAR-T细胞培养：终浓度3%（V/V）；
2.浓度优化梯度：2%、3%、4%、5%，实验室需根据自身细胞样本、活化方案确定最优添加量。
6.2 配制示例（500 mL基础培养基体系）
1. 取485 mL CTS OpTmizer基础培养基置于无菌储液瓶；
2. 无菌吸取15 mL 已解冻混匀的A2596101 CTS Immune Cell SR，加入基础培养基中；
3. 按需添加CTS GlutaMAX-I、重组人IL-2/IL-7/IL-15等CTS级细胞因子；
4. 轻柔颠倒混匀，标注培养基名称、配制日期、失效日期；
5. 2~8℃避光储存，4周内使用完毕；实验前取所需体积，37℃水浴复温至室温后方可使用。
七、免疫细胞标准培养实操流程
1. 分离人外周血PBMC，使用含3% CTS Immune Cell SR的完全培养基重悬细胞；
2. 采用CTS CD3/CD28 Dynabeads磁珠或OKT3抗体进行T细胞活化刺激；
3. 培养环境：37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱；每2~3天补液、分瓶，维持细胞适宜密度；
4. 基因修饰阶段（慢病毒转染CAR质粒）全程使用本体系培养基，不得更换血清/添加剂体系；
5. 细胞收获阶段，检测细胞活率、扩增倍数、免疫表型、杀伤功能，完成质量验证。
9 安全规范与使用禁忌
八、使用禁忌
1. 原液冻融次数不可超过2次，多次冻融会造成活性组分降解，细胞扩增能力显著下降；
2. 不可与胎牛血清、未经过验证的异种添加剂混用，会改变T细胞表型，影响细胞药效；
3. 本品为活性蛋白制剂，不可高温高压灭菌、过滤不可使用强酸强碱滤器；
4. 出现浑浊、沉淀、变色的试剂直接报废，禁止继续使用。
九、常见问题解答(FAQ)
1.什么是CTS？
Gibco细胞治疗系统（CTS）系列细胞和基因治疗产品均符合GMP生产标准，经过安全性测试，并提供监管文件支持，助力您从研发阶段顺利过渡到临床及商业化生产。通过我们的CTS解决方案，我们致力于帮助客户简化治疗开发流程、降低风险，并减轻其质量体系的负担。
2.CTS免疫细胞血清替代品（SR）的储存条件是什么？解冻后，我可以在-20摄氏度下分装并重新冷冻吗？
将初始产品完全解冻后，可分装并重新冷冻以备再次使用。解冻后的分装品在2-8℃下储存可稳定保存4周。
十、引用和文献
A Rapid Cell Expansion Process for Production of Engineered Autologous CAR-T Cell Therapies.
Authors:Lu TL, Pugach O, Somerville R, Rosenberg SA, Kochendefer JN, Better M, Feldman SA
Journal:Hum Gene Ther Methods
PubMed ID:27897048
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北京
