一、产品基础信息
1.1 产品基本参数
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产品全称
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Gibco™ CD FortiCHO™ Medium
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货号
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A1148301
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规格
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1L / 瓶
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品牌
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Gibco（Thermo Fisher 赛默飞）
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产品形态
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1× 无菌液体培养基
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配方核心属性
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化学成分完全确定、无血清、无动物源、无蛋白、无水解物、不含 L - 谷氨酰胺、无酚红、无抗生素
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运输条件
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室温
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1.2产品概述
CD FortiCHO™ 培养基经过特殊设计，能够在化学成分确定的环境中以最高的分批和分批补料培养性能及产量进行重组 CHO 细胞培养。这种无蛋白质、无动物来源成分的配方可提供一致性，并有助于减少筛选外源物的需要。使用 CD FortiCHO™ 培养基，细胞培养的持续时间比竞争性替代品长 2+ 天，这意味着降低了下游纯化中需要去除的 HCP（宿主细胞蛋白）浓度。
CD FortiCHO™ 培养基经过强化后能在悬浮分批培养中极大程度支持重组 CHO 细胞生长和蛋白表达，与选择单纯补充葡萄糖的竞争性培养基相比，其能实现高出 120% 的生长率和产量。对于所选细胞系和应用，CD FortiCHO™ 培养基配合 CD EfficientFeed™ C 营养补充剂使用也可实现比单用葡萄糖的流加培养高 75% 的流加培养生长率和产量。
何时使用 CD FortiCHO™ 培养基
• 您使用的细胞系是经过转染的 CHO K1、GS CHO 或 CHO-S™ 细胞系
• 需要达到尽可能高的分批培养细胞密度和蛋白滴度
• 您在尽量提高滴度时有时间让细胞适应新的培养基
• 收获时的细胞健康是下游工艺的优先考虑事项
1.3 核心产品优势
1. 超高批次稳定性，工艺可溯源
完全化学成分确定配方，无任何动物源未知组分，彻底规避批次差异、外源病毒、支原体污染风险，符合生物制药工艺溯源要求，大幅降低质检压力。
2. 支持超高细胞密度、超长培养周期
专为 CHO 悬浮细胞高密度流加培养优化，细胞活密度高、活率维持能力强，培养周期相较于普通 CHO 培养基显著延长，有效降低宿主细胞蛋白（HCP）与杂质残留，减轻下游纯化负担。
3. 抗体表达滴度高，适配规模化生产
是重组单抗、融合蛋白、生物类似药研发小试、中试主流基础培养基，搭配配套补料培养基可实现产量大幅提升，性能满足工业级工艺开发标准。
4. 广谱适配主流 CHO 细胞株
可直接用于 CHO-S、CHO-K1、GS-CHO、CHO-DG44 等悬浮细胞，覆盖细胞复苏、扩增、单克隆筛选、建库、表达生产全流程。
工艺放大兼容性极强
体系稳定，无驯化壁垒，可在摇瓶、搅拌式生物反应器、一次性罐体之间线性放大工艺，可无缝衔接 Dynamis 高端生产级培养基体系。
1.4产品性能展示
1. CD FortiCHOTM介质的性能测试(喂料批次)
CD FortiCHOTM饲料培养基在生长和滴度方面比限量葡萄糖饲喂批次表现优于CHOK1SV细胞类型近50%。细胞在从CD OptiCHO解冻后经过2次。TM在测试培养前冷冻。未向培养物添加谷氨酰胺。每当培养物中的葡萄糖水平低于2克/升时，添加4克/升葡萄糖。培养物在125毫升的摇瓶中生长。为EffcientFeed添加10%的培养体积。TM在第4天、第6天、第8天和第10天补充条件。
2. CD FortiCHOT媒体可以超越其他商业基础媒体
在试验培养前，细胞至少经过12次对所有产品进行适应。在250毫升摇瓶培养中不添加谷氨酰胺。当培养中葡萄糖水平低于2克/升时，将葡萄糖添加到4克/升。
3. CD FortiCHOTM含有CD高效Feed的介质TMC表现优于限量葡萄糖配给批次近50%
细胞从CD OptiCHO解冻后经过2次TM在测试培养前冷冻。不添加谷氨酰胺；每当培养中的葡萄糖水平低于2克/升时，添加4克/升葡萄糖。培养物在125毫升的摇瓶中生长。为高效饲料添加10%的培养体积。TM第4天、第6天、第8天和第10天的补充条件。
4. CD FortiCHOTM培养基优于各种具有CHOK1SV细胞类型的竞争性批量培养基
在试验培养前，所有产品的细胞至少经过12次以适应。在250毫升的摇瓶培养中不添加谷氨酰胺。每当葡萄糖水平时，葡萄糖添加到4克/升。
1.5 适用应用场景
1. 各类悬浮 CHO 工程细胞的日常维持、扩增培养；
2. 重组单克隆抗体、重组蛋白、融合蛋白瞬时 / 稳定株表达；
3. DHFR、GS 系统基因筛选、扩增、稳转株构建；
4. 细胞单克隆化筛选、细胞种子库建库培养；
5. 生物药前期工艺摸索、补料工艺优化、小试生产研究。
二、储存条件与保质期规范
2.1 储存条件
密封2~8℃避光冷藏保存，严禁冷冻。
冷冻会造成培养基内维生素、氨基酸等关键营养组分析出失活，直接导致培养基报废；长期光照会引发组分降解、氧化，影响细胞生长性能。
2.2 保质期标准
1. 未开封原厂状态：保质期 12 个月（以瓶身标注生产日期为准）；
2. 开封未添加谷氨酰胺：无菌密封避光保存，建议 1 个月内用完；
3. 完全配制培养基（加谷氨酰胺）：建议7~14 天内用完，避免营养衰减。
2.3 入厂使用质检标准
每次使用前目视检查：培养基澄清透亮、无浑浊、无沉淀、无絮状漂浮物、无异常变黄 / 褐变。出现任何异常立即废弃，严禁用于细胞培养。
三、标准操作使用说明
3.1 培养基配制预处理（关键必做步骤）
1. 提前将冷藏培养基取出，室温回温或 37℃水浴轻柔预热，禁止剧烈震荡，减少气泡产生；
2. 超净台无菌操作，补加谷氨酰胺：终浓度推荐 6 mM（范围 2–8 mM 均可），可选用 L - 谷氨酰胺或 GlutaMAX™稳定型谷氨酰胺；
3. 可选添加剂规范：
•DHFR 非筛选体系：每 1L 培养基添加 10 mL HT 添加剂；
•DHFR 基因扩增筛选体系：禁止添加 HT；
•细胞易聚团体系：可添加 Gibco 抗结团试剂，1 mL/L；
4. 充分轻柔混匀后，即为可用完全培养基。
3.2 CHO 悬浮细胞常规传代培养
1. 培养环境：37℃、8% CO₂、饱和湿度≥80%；
2. 摇床转速参考：
•25 mm 偏心距摇床：120–145 rpm；
•50 mm 偏心距摇床：90–110 rpm；
3. 标准接种密度：2×10⁵～3×10⁵ 活细胞 /mL；
4. 传代节点：细胞生长至 1.0×10⁶～1.5×10⁶ 活细胞 /mL 对数生长期及时传代，维持细胞活力≥90%；
5. 装液量要求：摇瓶工作体积≤总体积 40%，保证充足溶氧，防止细胞缺氧凋亡。
3.3 批次培养与流加表达工艺
1. 批次培养：标准密度接种，全程无补料，培养周期 7–10 天，根据蛋白滴度与细胞活率判定收获时间；
2. 推荐高产流加方案
以 CD FortiCHO 为基础培养基，搭配 CD EfficientFeed™ C 补料培养基 定时补料，可显著提升峰值细胞密度与最终抗体表达产量，为实验室主流高产工艺。
3.4 冻存说明
本产品为增殖表达培养基，不可直接用于细胞冻存，细胞冻存需使用专用无血清细胞冻存液体系。
四、重要注意事项
1. 强制补加谷氨酰胺：本培养基无内源谷氨酰胺，遗漏添加将直接导致细胞停滞、死亡；
2. 仅限悬浮 CHO 细胞：贴壁 CHO 细胞不可直接使用，需完整驯化后方可转入该体系；
3. 无酚红体系特点：无法通过颜色直观判断 pH 波动，实验中需定期监测 pH、葡萄糖、乳酸、渗透压等代谢参数；
4. 禁止常规加抗生素：长期培养、蛋白表达体系添加抗生素会抑制细胞代谢、降低抗体产量，仅高污染风险场景可微量使用；
5. 全程避光：储存、预热、培养全过程减少光照暴露，避免营养降解。
五、常见问题解答
Q1：A1148301 培养基能否开瓶直接使用？
答：不可以。 该配方不含谷氨酰胺，必须无菌补加谷氨酰胺 / GlutaMAX 后，方可用于细胞培养。
Q2：什么实验需要加 HT、什么实验不能加 HT？
答：DHFR 筛选扩增体系严禁添加 HT；普通稳转株维持、扩增、蛋白表达可正常添加 HT 添加剂。
Q3：该培养基最佳配套补料是什么？
答：官方最优配套为 CD EfficientFeed™ C 补料培养基，适配性最好、增产效果最稳定。
Q4：培养基可以冷冻保存吗？
答：绝对禁止冷冻，仅可 2–8℃避光冷藏。
QG5:如何使细胞适应无血清培养基？
答：细胞可以通过顺序或直接适应来适应。以下是每种方案的建议协议：
顺序适应性
1）将生长在血清补充培养基中的细胞分培养成25%:75%的SFM和血清补充混合培养基。
2）当细胞密度为5×10E5细胞/ml时，将细胞在细胞密度2.5×10E5至3×10E5的SFM和血清补充培养基中进行50%:50%的混合培养。
3） 在细胞密度为5×10E5细胞/ml后，继续以逐步增加的SFM比例进行继代培养，直到血清为~0.1%，细胞存活率约为85%。
4）用2.5×10E5至3×10E5细胞/ml的接种物将细胞分培养到SFM中。
5）当细胞密度为1×10E6至3×10E6细胞/ml（播种后4至6天）时，再次进行细胞分培养。
6）当细胞密度为1×10E6至3×10E6细胞/ml、存活率为90%时，应每隔3至5天在SFM中进行再培养。
直接适应
有些细胞可以直接从含血清培养基适应SFM。为了直接适应，细胞接种物应为1.5 x 10E5到3 x 10E5 细胞/ml。
当细胞密度为1×10E6至3×10E6细胞/ml时，应进行细胞分培养。当细胞密度在培养4至7天后为2×10E6到4×10E6 细胞/ml，细胞完全适应SFM。
适应SFM的细胞的库存培养物应每3到5天在SFM中进行次级培养，当细胞密度为1×10E6到3×10E6细胞/ml，存活率为90%时。
Q6：为什么需要逐渐使细胞适应无血清培养基？
答：有些细胞，如昆虫细胞，对培养基的变化很敏感。通过依次适应细胞，培养基的变化对细胞生长的影响最小。
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北京
