细胞的培养方法
发布时间:2013-7-8
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细胞培养方法

1、收到细胞,请查看瓶子是否有破裂,培养基是否漏出,是否浑浊,如有请尽快联系。

2、收到细胞,如包装完好,请在显微镜下观察细胞。因路途耽搁等因素,细胞会有部分脱落。先把细胞放入培养箱里静止3小时左右,让细胞先稳定下,然后在超净台中将培养瓶里的培养基吸出一部分,保留大约5-6ml左右在培养瓶里。将培养瓶置于37℃培养箱中培养,盖子微微拧松。吸出的培养基可以保存在灭菌过的瓶子里,存放于4℃冰箱,以备不时之需。

324小时后,细胞形态已恢复并贴满瓶壁,就可以传代了。(贴壁细胞)将培养瓶里的培养基倒去,加3-5ml(以能覆盖细胞生长面为准)PBSHanks’液洗涤后弃去。加0.5-1ml胰酶消化,消化时间以具体细胞为准,一般1-3分钟,不超过5分钟。可以放入37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁,见细胞脱落下来,加入3-5ml培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后将溶液吸入离心管内离心,1000rpm/5min。弃上清,视细胞数量决定分瓶数,一般一传二,如细胞量多可一传三,有些细胞不易传得过稀,有些生长较快的细胞则可以多传几瓶,以具体细胞和经验为准。(悬浮细胞)用移液管轻轻吹打瓶壁,直接将溶液吸入离心管离心即可。

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